視網(wǎng)膜血管網(wǎng)鋪片PAS染色
視網(wǎng)膜血管網(wǎng)鋪片是研究糖尿病視網(wǎng)膜病變 (diabetic retinopathy,DR)的金標準之一,可以定性、定量地評估視網(wǎng)膜血管形態(tài),包括血管走行、面積分布和管壁細胞結(jié)構(gòu),更直觀地了解DR微血管的病變情況。
PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上
染色結(jié)果:
視網(wǎng)膜毛細血管呈紅色,細胞核呈藍色。視網(wǎng)膜毛細血管呈紫紅色,細胞核呈藍色。閉鎖毛細血管細胞核消失,且管腔萎縮變細呈細線狀。
單獨剝?nèi)⊙矍蛞暰W(wǎng)膜,用胰酶消化去除視網(wǎng)膜內(nèi)細胞只保留血管網(wǎng),將血管網(wǎng)均勻地鋪在載玻片上進行PAS染色。PAS染色又稱過碘酸雪夫染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合呈現(xiàn)紫紅色,復(fù)染蘇木素,細胞核呈藍色。毛細血管基底膜含有大量糖類物質(zhì),經(jīng)PAS染色后呈現(xiàn)紫紅色,進而將血管網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)染出來。
樣本的保存運輸條件及注意事項:
1)整顆眼球4%PFA固定24h以上,常溫保存運輸。
2)固定樣本一個月內(nèi)送樣檢測,固定時間過長,制片效果不佳。
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